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repligen 9333-1蛋白A ELISA試劑盒說明書

更新時(shí)間:2022-11-29      點(diǎn)擊次數(shù):2763

repligen 9333-1蛋白A ELISA試劑盒說明書


MabSelect SuRe™ ELISA Kit Performance Summary

引言

蛋白A ELISA試劑盒(目錄號(hào)9333-1)用于檢測和定量殘留的MabSelect SuRe™ 配體。我們的蛋白A檢測ELISA試劑盒是為那些需要高靈敏度檢測以測量少量污染MabSelect SuRe的客戶開發(fā)的™ 抗體產(chǎn)物中的配體。污染測試發(fā)生在開發(fā)和商業(yè)制造的幾個(gè)不同階段,可能包括:

特定條件下樹脂浸出特性的工藝開發(fā)

制造,通常從純化過程中的幾個(gè)點(diǎn)采集的洗脫樣品

完成產(chǎn)品發(fā)布,以記錄過程控制水平和批次間一致性

以下總結(jié)報(bào)告包含在存在人免疫球蛋白G(hIgG)的情況下,從蛋白A ELISA試劑盒的評(píng)估中收集的性能數(shù)據(jù)。此處提供的數(shù)據(jù)證明了蛋白A ELISA試劑盒:

檢測MabSelect SuRe的能力™ 在PBS-T緩沖液中存在高達(dá)0.5mg/ml hIgG的配體

回收率(準(zhǔn)確度)、批間和批內(nèi)精密度、定量限和檢測限


結(jié)果摘要

MabSelect SuRe公司™ 在hIgG存在下

當(dāng)檢測MabSelect SuRe時(shí),評(píng)估蛋白A ELISA試劑盒的性能™ 與不含hIgG的標(biāo)準(zhǔn)相比,在hIgG存在下。所有加標(biāo)樣品的最終hIgG濃度為0.125mg/ml(在最終稀釋到測定板中之后)。每個(gè)樣品以8個(gè)重復(fù)制備,并根據(jù)試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行三次單獨(dú)的ELISA。

數(shù)據(jù)處理

將標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)點(diǎn)擬合到4參數(shù)擬合分析中。該方程允許反向計(jì)算樣品rPA濃度和LoQ值。回收率計(jì)算如下:


定量限值(LoQ)

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線測定的LoQ計(jì)算為0.025ng/ml。MabSelect SuRe的LOQ™ 在存在hIgG的情況下,配體加標(biāo)樣品為0.115ng/ml或0.920ng/mg(0.92ppm)。根據(jù)該數(shù)據(jù)設(shè)置檢測MabSelect SuRe時(shí)試劑盒的靈敏度™ 在存在免疫球蛋白的情況下,配體的濃度小于百萬分之一(ppm)。

稀釋線性度

計(jì)算說明

精度(%CV)

通過確定rPA加標(biāo)樣品數(shù)據(jù)點(diǎn)之間的標(biāo)準(zhǔn)偏差并除以平均值來計(jì)算精度。根據(jù)“工業(yè)指南:生物分析方法驗(yàn)證"文本,精度應(yīng)在15%以內(nèi)。

分析內(nèi)精密度

通過平均所有測定的%CV值,計(jì)算每個(gè)rPA加標(biāo)樣品濃度的測定內(nèi)精密度。

分析間精密度

通過測定三次測定的計(jì)算結(jié)果之間的標(biāo)準(zhǔn)差,然后除以平均值,計(jì)算每個(gè)濃度點(diǎn)的測定間精密度。

定量限(LoQ)

定量限(LoQ)定義為0 ng/ml樣品標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍。將0 ng/ml OD值的標(biāo)準(zhǔn)偏差乘以10,然后加到基礎(chǔ)0 ng/ml OD值上。然后通過將求和值輸入標(biāo)準(zhǔn)曲線4參數(shù)擬合方程來生成LoQ。對(duì)于每個(gè)試劑盒,在存在hIgG的情況下,rPA加標(biāo)樣品的LoQ報(bào)告為每毫升緩沖液中的ng蛋白A(ng/ml)和每毫克hIgG中的ng蛋白質(zhì)A(ppm)。

檢測限(LoD)

檢測限(LoD)定義為0 ng/ml蛋白A標(biāo)準(zhǔn)偏差的3倍

樣品將0 ng/ml OD值的標(biāo)準(zhǔn)偏差乘以3,然后加到基礎(chǔ)0 ng/ml OD值上。然后通過將求和值輸入標(biāo)準(zhǔn)曲線4參數(shù)擬合方程來生成LoD。對(duì)于每個(gè)試劑盒,LoD報(bào)告為每毫升(ng/ml)緩沖液中的ng蛋白a和百萬分之一(ppm)。

精確

準(zhǔn)確度描述為與理論加標(biāo)濃度相比,通過測定確定的回收率%。

MabSelect ™, MabSelect SuRe公司™ 和SuRe™ 是GE Healthcare的注冊(cè)商標(biāo)。



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