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immuquest IQ213說明書

更新時間:2019-02-27      點擊次數:2325

immuquest IQ213說明書

Anti-hnRNP K antibody [3C2] - ChIP Grade

抗hnRNP K抗體[3C2] - ChIP級

 

目錄號:IQ213

£226.00

 

目標抗原

hnRNP K. 

 

主要說明

小鼠抗hnRNP K [3C2] - ChIP等級

 

目錄編號

IQ213

 

數量

0.1毫升

 

濃度

1mg / ml的

 

克隆

3C2

 

主辦

老鼠 

 

同型

IgG2b的

 

免疫原

全長天然蛋白質(純化的)(人類)

 

骨髓瘤/融合伴侶

SP2 / 0

 

物種反應性

鼠標,大鼠,倉鼠,牛,人類,非洲爪蟾

 

純化

蛋白質A.

 

格式

純化的抗體(來自上清液)含有PBS 0.1%;Sodium azide

應用

WB,IP,ELISA,ICC / IF,流式細胞儀,ChIP /芯片,IHC(大鼠)

 

稀釋液

宜抗體稀釋應通過滴定確定,但作為指導嘗試;

WB:1/1000。檢測到約65 kDa的條帶(預測分子量:51 kDa)

流式細胞:使用1μg106個細胞

ChIP /芯片:以分析依賴稀釋度使用。PubMed:20673990

 

參考

高R等人。異質核核糖核蛋白K(hnRNP-K)通過誘導參與細胞外基質,細胞運動和血管生成的基因來促進腫瘤轉移。J Biol Chem。2013年5月24日; 288(21):15046-56。doi:10.1074 / jbc.M113.466136。Epub 2013年4月5日.ICC   / IF;  人類PMID:23564449

Marchand V等人。鑒定人免疫缺陷病毒1 tat / rev外顯子3的蛋白質配偶體導致發現新的HIV-1剪接調節因子蛋白質hnRNP K. RNA Biol。2011年3月至4月; 8(2):325-42。Epub 2011年3月1日  IP WB; 人類PMID:21368586

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細胞類型特異性和發育調節異質核核糖核蛋白K mRNA在大鼠神經系統。Blanchette AR等?;駿xpr模式。2006年8月; 6(6):596-606。Epub 2006 Feb 20  PMID:16488668

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Szeszel-Fedorowicz W等人。外顯子剪接沉默子參與葡萄糖-6-磷酸脫氫酶mRNA的調節剪接。J Biol Chem。2006年11月10日; 281(45):34146-58。Epub 2006年9月15日  WB; 人類大鼠 PMID:16980303 

Blanchette AR等。細胞類型特異性和發育調節異質核核糖核蛋白K mRNA在大鼠神經系統。基因Expr模式。2006年8月; 6(6):596-606。Epub 2006年2月20日  .IHC; 大鼠 PMID:16488668 

Yano M等人。通過p21 mRNA轉錄后調控,參與Hu和異質核核糖核蛋白K在神經元分化中的作用。J Biol Chem。2005年4月1日; 280(13):12690-9。Epub 2005年1月25日  WB; 鼠標 PMID:15671036

聚(C)結合異構核核糖核蛋白復合物K蛋白的表征和一級結構。Matunis M(Cell.Biol,1992年1月)  PMID:1729596

 

數據庫鏈接

Entrez Gene:528135牛

Entrez Gene:3190 Human

Entrez基因:15387鼠標

Entrez基因:117282大鼠

Omim:600712人類

SwissProt:Q3T0D0牛

SwissProt:P61978人類

SwissProt:P61979鼠標

SwissProt:P61980大鼠

Unigene:522257人類

Unigene:142872鼠標

Unigene:11854鼠

 

研究領域

染色質; RNA結合;

 

也稱為

CSBP抗體; dC拉伸結合蛋白抗體; FLJ41122抗體;異種核核糖核蛋白K抗體; hnRNP K抗體; HNRNPK抗體; HNRPK抗體; HNRPK_HUMAN抗體;轉化上調核抗體;轉化上調核蛋白抗體;轉化上調核蛋白抗體;轉化上調的核蛋白抗體; TUNP抗體

 

 

本產品僅供研究使用。不用于治療或診斷用途。

 

異質核RNA(hnRNA)的微粒復合物是高Mr的RNA分子的異質混合物,其在蛋白質合成過程中在細胞核中發生,具有細胞特異性和異質性的蛋白質。蛋白質組分可能在加工過程中起作用。 hnRNA對mRNA的影響

 

免疫熒光方案 - 甲醛固定

   1.從Tcunit收集細胞,并用吸力從培養皿中取出培養基。
   2.用1x PBS洗滌并取出。
   3.在室溫下在軌道振蕩器上將細胞在預熱(37℃)對甲醛中孵育12分鐘。
   4.去除PFA并在室溫下在1x PBS中的0.5%Triton X-100中孵育5分鐘。
   5.準備封閉試劑,這也是抗體稀釋劑。
   6.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次,在軌道振蕩器上洗滌4分鐘/洗滌。
   7.在室溫下用1%NCS和1x PBS封閉30分鐘。
   8.準備一抗(50μl/蓋玻片)和濕潤染色室。
   9.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次并短暫風干。
  10.在室溫下在黑暗的染色室中與一抗孵育1小時。在此期間準備二抗。
  11.用1x PBS洗滌細胞5次(每個燒杯更換5個燒杯/ 5個計數)
  12。在室溫下在黑暗的染色室中與第二抗體孵育1小時。
  13.用1x PBS洗滌細胞5次。
  14.登上達皮。

溶液(染色當天新鮮制備)。

    * 1x磷酸鹽緩沖鹽水。
    *封閉試劑:1x PBS中1%NCS(使用新鮮的10x PBS)。
    *固定液:3.5%對甲醛。

1.75g PFA在20ml d.H2O中加5滴1M NaOH。在50-60℃的熱板上攪拌直至溶解。加入4滴IN HCl并檢查pH指示條。PH值應為7.4。完成體積,d.H20至25ml,加入25ml 2xPBS。在添加到蓋玻片之前檢查pH值。


免疫熒光方案 - 甲醇/丙酮固定

   1.從TCunit收集細胞,并用吸力從培養皿中取出培養基。
   2.用1x PBS洗滌并取出。
   3.用冷甲醇:丙酮1:1在冰上固定細胞10分鐘。
   4.制備阻斷試劑,這也是抗體的稀釋劑。
   5.取出固定劑并在室溫下用1x PBS洗滌細胞3次,在軌道振蕩器上洗滌4分鐘。
   6.在室溫下用1%NCS和1x PBS封閉30分鐘。
   7.準備一抗(50?l /蓋玻片)和濕染色室。
   8.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次并風干約7分鐘。
   9.在室溫下在室溫下與一抗孵育1小時,在染色室中避光。在此期間準備二抗。
  10.用1x PBS洗滌細胞5次(每個燒杯更換5次燒杯/ 5次計數)
  11。在室溫下,在染色室的黑暗中與第二抗體孵育1小時。
  12.用1x PBS洗滌細胞5次。
  13.登上達皮。

溶液(染色當天新鮮制備)

    * 1x磷酸鹽緩沖鹽水。
    *封閉試劑:1x PBS中1%NCS(使用新鮮的10x PBS)。
    *固定液:甲醇:丙酮1:1冰冷。



Western Blotting Protocol

   1.將凝膠轉移到PDVF或硝酸纖維素膜上
   2.將膜置于封閉緩沖液中的塑料托盤中攪拌1小時
   3.在洗滌緩沖液中沖洗
   4.在洗滌緩沖液和一抗中孵育1小時
   5.洗滌6次X用洗滌緩沖液洗滌5分鐘
   6.在洗滌緩沖液和二抗中孵育1小時
   7.用洗滌緩沖液洗滌6X 5分鐘
   8.檢測(例如ECL,Amersham根據制造商的說明)

洗滌緩沖液
PBS + 0.1%Tween 20 

阻斷緩沖液
洗滌緩沖液+ 5%奶粉

所用抗體的濃度取決于每種抗體,抗原的量和所用的檢測方法。通常,稀釋在稀釋的幾百倍稀釋到幾千倍的范圍內,但通常必須憑經驗確定。

 

研究領域
染色質RNA結合
研究
表征聚(C)結合異質核核糖核蛋白復合物K蛋白的基本結構 - Matunis M通過p21 mRNA轉錄調控參與Hu和異質核核糖核蛋白K在神經元分化中的作用 - Masato Yano等

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